細(xì)胞工廠多用于大規(guī)模的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,在培養(yǎng)細(xì)胞的同時(shí),我們需要監(jiān)控細(xì)胞的生長(zhǎng)狀況,那么觀察細(xì)胞工廠培養(yǎng)效果的五個(gè)方面分別是:
1.細(xì)胞生長(zhǎng)曲線:細(xì)胞生長(zhǎng)曲線是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中最基本的指標(biāo),是測(cè)定細(xì)胞絕對(duì)增長(zhǎng)數(shù)值和生長(zhǎng)繁殖基本規(guī)律常用的簡(jiǎn)便方法。常用的方法為:在同一規(guī)格的培養(yǎng)瓶中,接種同等量的同一代細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后每隔24小時(shí)取出幾瓶細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),以培養(yǎng)時(shí)間為橫座標(biāo),不同時(shí)刻的細(xì)胞數(shù)的對(duì)數(shù)為底座標(biāo),標(biāo)出各點(diǎn)并連成線,即為該細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線,可反應(yīng)出細(xì)胞生長(zhǎng)的動(dòng)態(tài)。
2.細(xì)胞生長(zhǎng)倍數(shù):是指測(cè)定接種時(shí)活細(xì)胞的濃度,經(jīng)一個(gè)生長(zhǎng)周期達(dá)到最大活細(xì)胞濃度的比率。
3.細(xì)胞分裂指數(shù):是表示細(xì)胞增殖旺盛程度的指標(biāo)。它以被測(cè)1000個(gè)細(xì)胞中的分裂細(xì)胞數(shù)來(lái)計(jì)算。其方法為:用秋水仙素將細(xì)胞處理1~2小時(shí)后,按染色體制片法制片并染色,計(jì)算1000個(gè)細(xì)胞中分裂相的數(shù)目,重復(fù)4次取平均值,用百分比表示。
4.細(xì)胞接種存活率:又稱細(xì)胞貼壁率。它是細(xì)胞被制成分散的懸液后,以低密度(2~5個(gè)細(xì)胞/cm2)被接種到細(xì)胞工廠中,貼壁并能存活生長(zhǎng)形成細(xì)胞小群(克隆)的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)值,用以表示細(xì)胞的生存能力和細(xì)胞群的活力。
5.克隆形成率:克隆形成率反映細(xì)胞群體依賴性和增殖能力兩個(gè)重要性狀。由于細(xì)胞生物學(xué)性狀不同,細(xì)胞克隆形成率差別也很大,一般初代培養(yǎng)細(xì)胞克隆形成率弱,傳代細(xì)胞系強(qiáng);二倍體細(xì)胞克隆形成率弱,轉(zhuǎn)化細(xì)胞系強(qiáng);正常細(xì)胞克隆形成率弱,腫瘤細(xì)胞強(qiáng)。并且克隆形成率與接種密度有一定關(guān)系,做克隆形成率測(cè)定時(shí),接種細(xì)胞一定要分散成單細(xì)胞懸液,直接接種在碟皿中,持續(xù)一周,隨時(shí)檢查,到細(xì)胞形成克隆時(shí)終止培養(yǎng)。
以上是衡量細(xì)胞工廠中細(xì)胞生長(zhǎng)狀況的有關(guān)指標(biāo),通過(guò)這些指標(biāo)可以判斷細(xì)胞在培養(yǎng)容器中的生長(zhǎng)情況,以便及時(shí)發(fā)現(xiàn)情況,做出調(diào)整。
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