在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,對于細(xì)節(jié)的把控至關(guān)重要,任何的疏忽都有可能對結(jié)果產(chǎn)生影響,尤其是在使用細(xì)胞工廠這樣的多層培養(yǎng)容器時(shí)。今天我們就來講講,細(xì)胞工廠在培養(yǎng)時(shí)需要注意的小細(xì)節(jié)。
細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)
1、所有操作必須嚴(yán)格按照無菌操作的要求進(jìn)行。
2、提前預(yù)熱∶培養(yǎng)容器越大,要達(dá)到設(shè)定的培養(yǎng)溫度越長,所以在實(shí)驗(yàn)開始前,將細(xì)胞工廠和培養(yǎng)基預(yù)熱至培養(yǎng)溫度,可加快細(xì)胞貼壁,并顯著提高細(xì)胞回收率。
3、請緩慢操作,避免大幅晃動產(chǎn)生氣泡。氣泡可能導(dǎo)致培養(yǎng)基從上層流到下層,導(dǎo)致培養(yǎng)基分配不均勻。
4、避免酒精或消毒液噴灑到透氣蓋上,酒精或消毒液可能會濕潤疏水濾膜,導(dǎo)致不能透氣影響氣體交換或?qū)е虏僮鲿r(shí)不能平衡壓力。
細(xì)胞工廠收獲時(shí)注意事項(xiàng)
1、棄去培養(yǎng)液后使用無鈣無鎂磷酸鹽緩沖液(CMF-PBS)清洗細(xì)胞工廠(40~50 mL/層),若有需要重復(fù)清洗一次,確保將殘留的培養(yǎng)液清洗干凈。
2、加入消化液平均分布到每層(10~40 mL/層),輕輕前后左右傾斜細(xì)胞工廠,確保消化液完全浸過培養(yǎng)面,細(xì)胞出現(xiàn)間隙時(shí),棄去消化液,輕輕拍擊細(xì)胞工廠幫助細(xì)胞從生長面脫離。
3、細(xì)胞工廠采用多層結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì),由于不能清晰觀察中間層的細(xì)胞消化狀態(tài),建議參照完全相同培養(yǎng)條件下的培養(yǎng)瓶或單層細(xì)胞工廠的消化狀態(tài),或使用專用的多層細(xì)胞培養(yǎng)器觀察臺來觀察每層細(xì)胞的生長狀態(tài)。
4、若細(xì)胞懸液收集完成后細(xì)胞工廠培養(yǎng)層存在大量細(xì)胞,則需要清洗多次或調(diào)整細(xì)胞消化的操作。
5、培養(yǎng)溫度及CO2濃度的偏差可能影響到細(xì)胞的收獲率,需密切關(guān)注培養(yǎng)過程中的溫度和CO2濃度設(shè)定值是否滿足需求。
這就是富道細(xì)胞跟大家分享的細(xì)胞工廠培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)的注意事項(xiàng),注意以上這些小細(xì)節(jié)讓你的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)事半功倍富道專注高端生物耗材的研發(fā)、生產(chǎn)與銷售。
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