細胞抱團是利用細胞搖瓶進行細胞培養(yǎng)時的常見問題,細胞成團后將影響細胞的正常生長與繁殖,那么,如果出現(xiàn)這種情況該如何解決呢?
首先,細胞成團并不一定都會影響細胞培養(yǎng)進程。如果細胞輪廓清晰胞體通透,呈串狀均勻聚集,證明細胞的生長狀態(tài)良好。但多數情況下,聚團的細胞都是輪廓模糊、透光性差,甚至會出現(xiàn)合胞體,伴有細胞碎片,這證明細胞已經衰老或產生病變,狀態(tài)不佳。解決細胞成團問題可以通過以下幾種方式:
1、如果細胞抱團不影響生長就沒問題,只是計數時較麻煩。在消化時,可在細胞由多角形變成圓型之前,用手輕磕細胞搖瓶的側壁,使細胞從壁上脫落(最好不要吹打,對細胞形狀和生長都不好)。
2、如果感覺有死細胞的 DNA,在細胞懸液中加入幾滴無菌的 DNAse(1mg/ml 溶于水)將 DNA 鏈打斷。輕柔地吹打細胞,防止對細胞膜造成物理損傷。
3、如果細胞抱團是肉眼可見的,可讓細胞靜置半分鐘左右,然后吸取上半部分沒有抱團的細胞懸液來傳代。如果細胞抱團肉眼不可見,目前還沒有特別好的分離方法,只能等細胞狀態(tài)改善后將這部分細胞慢慢排除出去。
細胞搖瓶內的細胞出現(xiàn)抱團現(xiàn)象,可以按照以上方法進行處理,在細胞培養(yǎng)過程中需要及時觀察細胞的生長狀態(tài),并針對所出現(xiàn)的情況做出相應的調整。
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