細(xì)胞傳代是細(xì)胞培養(yǎng)中的常見操作,是指將細(xì)胞從一個(gè)培養(yǎng)容器轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)容器,以促使細(xì)胞繼續(xù)增殖和生長。下面是細(xì)胞工廠中細(xì)胞傳代操作的一般步驟:
1.準(zhǔn)備細(xì)胞培養(yǎng)物:取出細(xì)胞培養(yǎng)物,并檢查細(xì)胞的狀態(tài)和密度。確保細(xì)胞培養(yǎng)物在最佳生長狀態(tài)下,并評(píng)估細(xì)胞數(shù)量和健康程度。
2.預(yù)處理培養(yǎng)容器:選擇適當(dāng)規(guī)格的細(xì)胞工廠,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量和預(yù)計(jì)生長時(shí)間,添加適量的培養(yǎng)基或培養(yǎng)液。
3.潤洗細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)物中的細(xì)胞用培養(yǎng)液潤洗,去除細(xì)胞培養(yǎng)物中的殘留物和廢液。通常使用無菌的緩沖液如PBS(磷酸鹽緩沖液)或無菌的細(xì)胞培養(yǎng)基進(jìn)行潤洗。
4.細(xì)胞解離:加入適當(dāng)?shù)募?xì)胞解離酶、酶胺或溫和的緩沖液來解離細(xì)胞,以使其分散成單個(gè)細(xì)胞。時(shí)間和條件應(yīng)根據(jù)具體細(xì)胞類型和解離試劑進(jìn)行優(yōu)化。
5.計(jì)數(shù)細(xì)胞:使用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀或倒數(shù)器,對(duì)解離的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),以確定細(xì)胞的濃度和數(shù)量。根據(jù)需要計(jì)算和調(diào)整細(xì)胞的傳代比例。
6.接種新的培養(yǎng)容器:將適量的細(xì)胞加入預(yù)處理好的新細(xì)胞工廠中繼續(xù)培養(yǎng)。
以上是細(xì)胞工廠中細(xì)胞傳代的操作步驟,在操作的時(shí)候我們要嚴(yán)格地遵循無菌原則,因?yàn)榧?xì)胞很容易因?yàn)椴僮鞑划?dāng)而受到污染。當(dāng)然,你也可以借助細(xì)胞工廠專用的管路系統(tǒng),降低細(xì)胞污染風(fēng)險(xiǎn)。