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細(xì)胞工廠培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)受各種因素的影響，這些因素看似不起眼，若不注意就會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞負(fù)傷慘重。那么，這些小細(xì)節(jié)究竟如何影響細(xì)胞生長(zhǎng)，在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)我們又該如何避坑呢？今天的富道課堂，帶大家學(xué)習(xí)影響細(xì)胞生長(zhǎng)的因素。

細(xì)胞工廠內(nèi)細(xì)胞之間的接觸程度

正常細(xì)胞（二倍體）存在貼壁接觸抑制，長(zhǎng)滿后細(xì)胞生長(zhǎng)停止，而腫瘤細(xì)胞等非正常細(xì)胞，接觸抑制作用較弱，可生長(zhǎng)至較高的細(xì)胞密度，但某些細(xì)胞過度生長(zhǎng)，其損傷難以逆轉(zhuǎn)，所以培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)不建議細(xì)胞密度太高。

劃重點(diǎn)：一般細(xì)胞匯合度達(dá)到 70-80% 即可傳代，切忌長(zhǎng)得太滿。

細(xì)胞工廠內(nèi)細(xì)胞生長(zhǎng)附著物

貼壁細(xì)胞在正常情況下都會(huì)貼壁，但一些細(xì)胞本身貼壁不牢或貼壁性差，這個(gè)時(shí)候包被附著物能夠促進(jìn)細(xì)胞的黏附，所以在培養(yǎng)一些特殊細(xì)胞時(shí)，需要對(duì)細(xì)胞工廠內(nèi)進(jìn)行包被后使用。常用的基質(zhì)有多聚賴氨酸（D 型、L 型）、明膠、膠原蛋白、細(xì)胞外基質(zhì)混合物，培養(yǎng)時(shí)可根據(jù)需要自行選擇。劃重點(diǎn)：細(xì)胞貼壁差時(shí)可使用基質(zhì)包被細(xì)胞工廠內(nèi)。

大多數(shù)細(xì)胞系在 pH7.4 左右時(shí)生長(zhǎng)最好，而常規(guī)培養(yǎng)基的指示劑為酚紅，所以多數(shù)情況下，我們所見的培養(yǎng)基都呈紅色，但不同培養(yǎng)基的顏色會(huì)有差異，例如 DMEM 比 1640 顏色深一點(diǎn)。在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，也可以根據(jù)培養(yǎng)基的顏色判斷細(xì)胞狀態(tài)，如隨著細(xì)胞生長(zhǎng)，培養(yǎng)基顏色會(huì)變淺變黃。

劃重點(diǎn)：培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)關(guān)注培養(yǎng)基顏色變化，發(fā)現(xiàn)異常及時(shí)處理。

細(xì)胞工廠內(nèi)培養(yǎng)溫度

對(duì)于大部分人源細(xì)胞和溫血?jiǎng)游锛?xì)胞系來(lái)講，比較適宜的培養(yǎng)溫度是 37℃，因?yàn)檫@個(gè)溫度接近體溫，但為了安全可以再稍低一些，細(xì)胞工廠內(nèi)高于體溫的溫度要比低于體溫的溫度更易產(chǎn)生問題。對(duì)于禽類細(xì)胞，由于其體溫較高，所以培養(yǎng)溫度可以設(shè)置為 38.5℃左右。

劃重點(diǎn)：培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)保持溫度穩(wěn)定，不要長(zhǎng)時(shí)間敞開培養(yǎng)箱的門，并且不要將培養(yǎng)器皿大量重疊堆放在培養(yǎng)箱中，避免空氣不循環(huán)。

細(xì)胞工廠內(nèi)氣相組分

大部分培養(yǎng)基適合于 95% 空氣 5%CO2，但有部分培養(yǎng)基例外，如 L15 培養(yǎng)基適合于 100% 空氣，CO2 會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)液 PH 降低（培養(yǎng)液變黃），嚴(yán)重影響細(xì)胞生長(zhǎng)；若需要用 L15 培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞，但沒有 100% 空氣培養(yǎng)箱時(shí)，可以擰緊瓶蓋或換培養(yǎng)基（效果可能更好）培養(yǎng)。適用于 CO2 環(huán)境的培養(yǎng)基需保持培養(yǎng)瓶透氣。

劃重點(diǎn)：培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)注意參照說明書選擇培養(yǎng)基，并注意培養(yǎng)壞境。

當(dāng)然，影響細(xì)胞生長(zhǎng)的因素還有很多，如細(xì)胞培養(yǎng)耗材選擇是否得當(dāng)、質(zhì)量是否過關(guān)等。富道細(xì)胞專注高端生物耗材的研發(fā)、生產(chǎn)與銷售，所有產(chǎn)品均按照 c-GMP 標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)，遵循 ISO9001、ISO13485 質(zhì)量管理體系要求，從原料、生產(chǎn)成型、表面處理、密封檢測(cè)、內(nèi)包裝、外包裝、滅菌等方面層層把控，確保最終質(zhì)量。