我們在使用細胞搖瓶來培養(yǎng)細胞時總會遇到各種各樣的問題,富道細胞今天跟大家分享一下我們在使用細胞搖瓶培養(yǎng)細胞時的注意事項。
懸浮細胞常規(guī)推薦接種密度:3-5×105cell/mL,生長到2×106cell/mL左右可繼續(xù)傳代;該密度建議為理論值,實際按照每個細胞特性有波動;培養(yǎng)懸浮細胞需要穩(wěn)定的生長環(huán)境,少操作,少觀察,更有利于細胞生長;
不建議將聚團的細胞頻繁吹散,等待密度高和狀態(tài)改善時,細胞會自行散開;部分細胞聚團生長為特性,吹散不利于生長,請注意查看相關(guān)培養(yǎng)說明;有些細胞本身就是聚團生長(NK92,NK92MI,JURKAT,H209,ATT20等),有些細胞本身就形態(tài)不圓(H9等),為正常現(xiàn)象,無需特殊處理;
豎瓶培養(yǎng)可以促進細胞生長,但由于拿出來觀察時都是橫瓶,觀察久了細胞會貼到底部,觀察完再次豎起來就會有細胞掛在瓶底部,而細胞沒有培養(yǎng)基滋潤很快就會死掉并殘留在壁上,從而導致養(yǎng)著養(yǎng)著細胞越來越少,貼壁細胞越來越多;因此,在培養(yǎng)瓶豎置操作時需注意吹下細胞搖瓶底部的細胞,避免細胞殘留。