富道細胞跟大家分享了細胞工廠內(nèi)細胞為什么要貼壁的原因,那如果我們在使用細胞工廠培養(yǎng)細胞時發(fā)現(xiàn)細胞工廠內(nèi)細胞貼壁不理想的情況下,也不需要太著急,我們可以從以下幾個方面來分析細胞工廠內(nèi)細胞不貼壁的原因:
細胞工廠內(nèi)細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間:消化不夠細胞本身就是成團的;若胰酶處理太久,容易造成細胞膜蛋白損傷,使細胞不能貼壁在細胞工廠內(nèi),顯微鏡下觀察立體感不強,嚴(yán)重的時候甚至?xí)斐杉毎劳觥?/span>
細胞缺少貼壁因子:血清中含有促貼壁因子,而無血清培養(yǎng)基工藝中由于缺少這種促貼壁因子,細胞在細胞工廠內(nèi)的貼壁效果會下降很多。
支原體或細菌的污染。培養(yǎng)液配置、儲存不當(dāng),如 pH 值過堿,Gln 量太少等原因。復(fù)蘇時處理速度太慢,復(fù)蘇過程不當(dāng)。接種細胞數(shù)目太少,無法分泌足夠的細胞外基質(zhì),也會影響細胞工廠內(nèi)細胞的貼壁性能或者就是在復(fù)蘇的細胞本身狀態(tài)不好,已經(jīng)老化,失去貼附性。
那我們在了解了不貼壁的各種原因之后我們就可以對癥下藥來改善細胞工廠內(nèi)細胞根據(jù)細胞種類來適當(dāng)來消化細胞,一般時間為5min,容易脫落的時間控制在2-3min即可,選用經(jīng)過表面改性處理的細胞工廠,找正規(guī)廠家。需要正確配制消化液或培養(yǎng)液。使用合適細胞工廠內(nèi)的細胞外基質(zhì)或貼壁試劑。復(fù)蘇新的細胞,第一周用 20% 血清幫助細胞復(fù)原。傳代接種一定要鋪的均勻,避免細胞抱團生長。細胞傳代 24 小時之內(nèi),最好不要晃動,以免影響細胞工廠內(nèi)細胞貼壁性。
這就是富道細胞為大家分享的細胞工廠內(nèi)細胞不貼壁怎么辦的原因和解決辦法,希望對大家有所幫助。
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